Аллергия, атопия, астма - раздела Иммунология

Полиморфизмы

Интерпретация результатов по теме теста и дополнительные данные, носящие исключительно информационный характер, по результатам исследования полиморфизмов TNF (G-308A; -308G/A; -308G-A; TNF1/TNF2; 308.1/308.2), IL4 (C-589T; C-590T; -589C>T), IL4R (Gln576Arg; Gln551Arg; Q576R), IL10 (A-1082G; -1082G>A; G-1082A),  IL13 (g.7100A>G; c.431A>G; p.Gln144Arg; p.Gln130Arg)

Аллергия – патологическая реакция иммунной системы, связанная с повышенной чувствительностью к различным веществам – аллергенам. Гиперчувствительность является результатом нарушения механизма иммунного ответа при повторных воздействиях аллергена на ранее сенсибилизированный этим аллергеном организм и характеризуется чрезмерной активацией тучных клеток и базофилов иммуноглобулинами Е (IgE), переходящей в общий воспалительный ответ.

Атопия и астма являются заболеваниями, проявляющими выраженную симптоматику при воздействии различных аллергенов, как правило, развивающуюся у лиц с наследственной предрасположенностью к аллергическим реакциям.

Ген GSTT1 (Ген тета-1 глутатион S-трансферазы)

Глутатион S-трансферазы (GST) участвуют не только в реакциях биотрансформации ксенобиотиков, но и широкого ряда эндогенных субстратов, играющих важную роль в регуляции бронхоспазма и воспалительной реакции. Ген суперсемейства глутатион-S-трансфераз GSTT1 кодирует один из ферментов системы детоксикации ксенобиотиков тета-1 глутатион S-трансферазу, участвующий в очищении организма от ксенобиотиков. В случае делеции гена (Null genotype) соответствующий фермент не продуцируется, вследствие чего повышается чувствительность организма к воздействию токсинов и канцерогенов. Наличие делеции в гене GSTT1 способствует повышению уровня IgE и развитию атопического дерматита в раннем возрасте.

Ген GSTM1 (Ген мю-1 глутатион S-трансферазы) 

Кодирует белок глутатион S-трансферазу. Ферменты класса мю S-трансферазы участвуют в детоксикации электрофильных соединений, в том числе канцерогенов, лекарственных препаратов, токсинов окружающей среды и продуктов окислительного стресса, в сопряжениии с глутатионом. Делеция в гене GSTM1 способствует развитию более тяжелого течения заболевания, увеличения частоты обострения, диффузному поражению кожных покровов.

Ген TNF 

Кодирует мультифункциональный провоспалительный цитокин, принимающий участие в широком спектре биологических процессов, таких как пролиферация клеток, дифференциация, апоптоз, метаболизм липидов и коагуляция. Этот цитокин связан с рядом патологий, включая аутоиммунные и онкологические заболевания. Наличие мутантного аллеля -308A повышает уровень экспрессии TNF, что способствует повышению риска развития таких заболеваний, как астма, ревматоидный артрит, псориаз, болезнь Крона и др.

Ген IL10 

Кодирует интерлейкин 10 – цитокин, подавляющий воспалительные реакции путем ингибирования синтеза цитокинов Т-хелперов, в том числе гамма-интерферона, фактора некроза опухоли, интерлейкинов 2, 3 и 6, а также антигенов MHC 2 класса и усиливает выживаемость и пролиферацию В-клеток и продукцию антител. Наличие мутантного аллеля -1082G приводит к снижению синтеза цитокина, способствуя снижению противовоспалительной активности и повышению риска атопии.

Ген ADRB2 

Кодирует β-2 адренорецептор, присутствующий на поверхности гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, бронхо-легочной системы, участвует в регулировании их иннервации, усиливая или подавляя ее активность. Наличие полиморфизма А46G (16Arg) в гене ADRB2 может привести к уменьшению гипотензивного эффекта и развитию артериальной гипертензии. Кроме того, к эффектам полиморфизма можно отнести риск возникновения ночной формы бронхиальной астмы, тяжелой формы бронхиальной астмы, гиперреактивности бронхов и ожирения. Пациенты, гомозиготные по этому варианту гена, быстрее теряют чувствительность к бронходилататорам и нуждаются в терапии кортикостероидами.

Белок, кодируемый геном IL4 является плейотропным цитокином, лигандом для рецептора IL-4. Рецептор IL-4 также связывает IL-13. IL-4 является основным цитокином Th2 иммунного реагирования и приводит к развитию атопии, определяя продукцию антител IgЕ к этиотропным аллергенам. У носителей аллеля -589T уровень продукции IL-4 повышен, что приводит к угнетению клеточного иммунитета и повышению уровня IgE. Это является одним из ведущих факторов риска развития как аллергической, так и инфекционно-зависимой бронхиальной астмы.

Ген IL4R 

Кодирует альфа-цепь рецептора интерлейкина-4, связывающего IL-4 и IL-13, регулируя таким образом выработку IgE. Мутации этого гена связаны с атопией, которая может проявляться как аллергический ринит, синусит, астма или экзема. Наличие мутантного аллеля 576Arg приводит к образованию формы рецептора, обладающей пониженным сродством к SHP-1, что повышает риск развития бронхиальной астмы.

Ген IL13 (интерлейкин-13) 

Является центральным регулятором в синтезе IgE, связан с гиперсекрецией слизи, гиперреактивностью бронхов, является медиатором аллергического воспаления и различных заболеваний, включая астму. Наличие мутантного аллеля повышает активность интерлейкина 13, повышая уровень IgE, увеличивает риск развития атопического дерматита и аллергического ринита.

Взятие образцов венозной крови для исследования ДНК может производиться в любое время суток, прием пищи или специальная диета не повлияют на результат. 

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

• переливание крови или трансплантация костного мозга, которые проводились в недавнем времени (в данном случае исследование ДНК не рекомендуется проводить в течение, как минимум, 1 месяца после трансплантации или переливания крови);
• контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется в любое время суток. 

• Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов.
• Непосредственно перед взятием образцов тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта. Подождать пару минут, чтобы во рту накопилась слюна.
• У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления.
• Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.
• Перед взятием образца наденьте стерильные перчатки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой.

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы буккального эпителия должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах.

Для выполнения данного исследования используются образцы биологического материала двух типов: венозная кровь или буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Венозная кровь

Тип пробирки: Вакуумная пробирка с ЭДТА

Минимальный объем биологического материала: 2 мл (допускается прием пробирок объемом 4-6 мл)

Процедура взятия биологического материала:

Взятие крови осуществляют из вены в положении пациента сидя или лежа. Кровь должна поступать свободным током непосредственно в вакуумную пробирку с ЭДТА (фиолетовая крышка). После взятия крови пробирку следует плавно перевернуть 5-10 раз для перемешивания с антикоагулянтом.

Центрифугирование: не требуется

Условия хранения: хранение биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ (допускается накапливание биоматериала в заданном температурном режиме до 7 календарных дней). При более длительном хранении кровь необходимо заморозить при температуре -18…-23℃

Условия транспортировки:

Транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (синяя коробка). Замороженный биоматериал – при температуре -18…-23℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (красная коробка).

Не рекомендуется проводить повторное замораживание – оттаивание образцов

Буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется с внутренней стороны щеки с использованием одноразовых зондов.

Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов

Состав набора для взятия буккального эпителия:

• зонд с щеточкой, 2 шт.;
• стерильная емкость для зонда с щеточкой, 2 шт.;
• стерильные одноразовые перчатки, 1 пара;
• индивидуальный zip пакет, 1 шт.

Процедура взятия биологического материала:

Непосредственно перед взятием образцов необходимо тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта.

Подождите пару минут, чтобы во рту накопилась слюна. Наденьте стерильные перчатки. Аккуратно извлеките зонд из упаковки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой. Сделайте щеточкой 10-20 круговых движений по внутренней поверхности обеих щек. Извлеките зонд из ротовой полости, поместите его в стерильную сухую емкость, закройте крышку. Повторите эту процедуру вторым зондом. После взятия второго образца поместите второй зонд во вторую емкость. Обе емкости с зондами поместите в индивидуальный zip-пакет.

У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления. Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах

Условия хранения : при температуре +18+25℃

Условия транспортировки: 

транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +18+25℃