Генетическая предрасположенность к бесплодию у мужчин - раздела Акушерство, гинекология, урология

Бесплодие — неспособность зачать ребенка в течение года регулярной половой жизни без использования противозачаточных средств. Согласно ВОЗ в мире около 50 млн супружеских пар (7% от общего количества) сталкиваются с мужским или женским бесплодием. Из этого количества случаев бесплодия на генетически детерменированные формы приходится порядка 50%.

В ряде случаев возможно проведение лечения с частичным или полным восстановлением фертильности, а в ряде случаев восстановление фертильности невозможно и проводится лишь заместительная гормональная терапия и другие виды коррекции дефектов. Среди генетических причин бесплодия у мужчин преобладают следующие причины — хромосомные аномалии (синдром Клайнфельтера, синдром Де Шапеля, микроделеции AZF-локуса и др.), моногенные заболевания (муковисцидоз, болезнь Кеннеди, синдром Каллмана, синдром Нунан и др.), мультифакториальные заболевания (сахарный диабет, ожирение, полиморфизмы генов ответственных за метаболизм половых гормонов и др.).

В данной панели рассмотрены следующие блоки:
1) Хромосомные - делеции в локусе AZF (AZFa, AZFb, AZFc).
2) Моногенные — мутации в гене CFTR.
3) Мультифакториальные — полиморфизмы в генах AR, SHBG, SRD5A2.

Ген CFTR кодирует белковый трансмембранный ионный канал, транспортирующий ионы хлора через мембрану клетки. Этот ионный канал принимает участие в формировании секретов железистых органов — поджелудочная железа, печень, железы слизистых оболочек ЖКТ, дыхательных путей, репродуктивных органов (предстательная железа, семенные пузырьки).

Мутации в гене CFTR приводят к развитию наследственного заболевания муковисцидоз или кистозный фиброз. При этом заболевании у больных наблюдаются повышение концентрации хлоридов в потовой жидкости, сильное загустение секретов желез внешней секреции с закупоркой выводных протоков с формированием железистых кист и фиброзу тканей вокруг них.

По мере прогрессирования заболевания могут развиваться тяжелые формы обструктивной болезни легких с формированием бронхоэктазов и развитию тяжелой легочной недостаточности, поражение поджелудочной железы с развитием выраженной экзокринной недостаточности и формированием синдрома мальабсорбции. Так же у пациентов почти всегда развивается обструктивная азооспермия в связи с отсутствием семявыносящего протока или его закупоркой вязким секретом. Болезнь наследуется по аутосомно-рецессивному типу и для развития симптомов нужно унаследовать мутантный аллель от обоих родителей в гомозиготной или компаунд-гетерозиготной форме.

Встречаются случаи изолированной обструктивной азооспермии у носителей гетерозиготной мутации в гене CFTR или при гомозиготном или компаунд-гетерозиготном носительстве мягких мутаций, при которых у пациентов отсутствуют почти все признаки болезни, кроме обструктивной азооспермии. Во всех случаях подозрения на муковисцидоз рекомендуется проведение потовой пробы и генетического теста на мутации в гене CFTR.

Локус AZF это участок Y-хромосомы, который содержит ряд генов отвечающих за сперматогенез. Локус AZF включает в себя 3 субрегиона, мутации в генах этих субрегионов или утрата самих субрегионов приводят к значительному снижению концентрации или полному отсутствию сперматозоидов в эякуляте. На микроделеции приходится 8%

Взятие образцов венозной крови для исследования ДНК может производиться в любое время суток, прием пищи или специальная диета не повлияют на результат. 

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

• переливание крови или трансплантация костного мозга, которые проводились в недавнем времени (в данном случае исследование ДНК не рекомендуется проводить в течение, как минимум, 1 месяца после трансплантации или переливания крови);
• контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется в любое время суток. 

• Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов.
• Непосредственно перед взятием образцов тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта. Подождать пару минут, чтобы во рту накопилась слюна.
• У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления.
• Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.
• Перед взятием образца наденьте стерильные перчатки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой.

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы буккального эпителия должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах.

Для выполнения данного исследования используются образцы биологического материала двух типов: венозная кровь или буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Венозная кровь

Тип пробирки: Вакуумная пробирка с ЭДТА

Минимальный объем биологического материала: 2 мл (допускается прием пробирок объемом 4-6 мл)

Процедура взятия биологического материала:

Взятие крови осуществляют из вены в положении пациента сидя или лежа. Кровь должна поступать свободным током непосредственно в вакуумную пробирку с ЭДТА (фиолетовая крышка). После взятия крови пробирку следует плавно перевернуть 5-10 раз для перемешивания с антикоагулянтом.

Центрифугирование: не требуется

Условия хранения: хранение биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ (допускается накапливание биоматериала в заданном температурном режиме до 7 календарных дней). При более длительном хранении кровь необходимо заморозить при температуре -18…-23℃

Условия транспортировки:

Транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (синяя коробка). Замороженный биоматериал – при температуре -18…-23℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (красная коробка).

Не рекомендуется проводить повторное замораживание – оттаивание образцов

Буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется с внутренней стороны щеки с использованием одноразовых зондов.

Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов

Состав набора для взятия буккального эпителия:

• зонд с щеточкой, 2 шт.;
• стерильная емкость для зонда с щеточкой, 2 шт.;
• стерильные одноразовые перчатки, 1 пара;
• индивидуальный zip пакет, 1 шт.

Процедура взятия биологического материала:

Непосредственно перед взятием образцов необходимо тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта.

Подождите пару минут, чтобы во рту накопилась слюна. Наденьте стерильные перчатки. Аккуратно извлеките зонд из упаковки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой. Сделайте щеточкой 10-20 круговых движений по внутренней поверхности обеих щек. Извлеките зонд из ротовой полости, поместите его в стерильную сухую емкость, закройте крышку. Повторите эту процедуру вторым зондом. После взятия второго образца поместите второй зонд во вторую емкость. Обе емкости с зондами поместите в индивидуальный zip-пакет.

У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления. Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах

Условия хранения : при температуре +18+25℃

Условия транспортировки: 

транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +18+25℃