Скорость метаболизма ксенобиотиков (лекарственных средств) – расширенный - раздела Метаболизм ксенобиотиков

Полиморфизмы

Интерпретация результатов по теме теста и дополнительные данные, носящие исключительно информационный характер, по результатам исследования полиморфизмов CYP2D6 (CYP2D6*2, 2850 C>T), CYP2D6 (CYP2D6*3, 2549 delA), CYP2D6 (CYP2D6*4, 1846G > A; 1934G > A), CYP2D6 (CYP2D6*6, 1707 delT; 1795 delT), CYP2C19 (CYP2C19*17; -806 C>T), CYP1A2 (CYP1A2*1C; rs2069514; -3860G>A)

Цитохромы P450 (CYP) представляют собой семейство гемсодержащих ферментов, отвечающих за метаболизм множества эндогенных и экзогенных субстратов. Ферменты системы цитохрома Р450 катализируют 70-80% реакций на всех стадиях метаболизма лекарств. Данный класс включает более 50 изоферментов, известно более 400 индивидуальных форм цитохромов. Изменения в ДНК могут привести к нарушению процесса метаболизма субстратов ферментов, в частности, различных лекарственных средств. В зависимости от того, к каким последствиям для скорости биотрансформации ЛП приводит носительство мутантных аллелей исследуемых генов, пациенты могут быть разделены на следующие группы:

• Распространенные метаболизаторы (extensive metabolism, ЕМ) — пациенты с нормальной скоростью биотрансформации ЛП, они имеют «дикие» генотипы (гомозиготы по нормальному типу). Для этих пациентов применяются стандартные режимы дозирования средних доз ЛП.
• Медленные метаболизаторы (poor metabolism, РМ) — пациенты со сниженной скоростью биотрансформации ЛП-субстратов. У таких пациентов происходит синтез «дефектного» фермента, либо фермент отсутствует, в результате чего ферментативная активность снижается (гетерозиготное носительство), либо вообще отсутствует (гомозиготное носительство). Это может приводить к следующим особенностям биотрансформации ЛП: у медленных метаболизаторов ЛП, которые изначально являются активными соединениями, накапливаются в организме в высоких концентрациях, что приводит к появлению неблагоприятных побочных реакций. Для медленных метаболизаторов необходимо снижение дозы ЛП. Если ЛП является пролекарством (действующим веществом является не сам ЛП, а его метаболит), то у медленных метаболизаторов образуется меньше активного метаболита, что может привести к неэффективности лечения.
• Быстрые метаболизаторы (ultraextensive metabolism, UM) — пациенты с повышенной скоростью биотрансформации ЛП. У данных пациентов отмечается недостаточная для достижения терапевтического эффекта доза ЛП-субстрата. Если ЛП является пролекарством, то у сверхактивных метаболизаторов образуется больше активного метаболита, что может привести к развитию неблагоприятных побочных реакций.

Ген CYP1A2 

Кодирует протеины семейства цитохромов P450. Белки цитохрома P450 –монооксигеназы, которые катализируют многие реакции, включающие лекарственный метаболизм и синтез холестерина, стероидов и других липидов. Р450 играют важную роль в окислении многочисленных соединений, как эндогенных (стероиды, желчные кислоты, жирные кислоты, простагландины, лейкотриены, биогенные амины), так и экзогенных (лекарства, яды, продукты промышленного загрязнения, пестициды, канцерогены, мутагены и т.п.).

Ген CYP2C19 

Кодирует белок - член семейства цитохрома Р450, являющийся ферментом первой фазы детоксикации ксенобиотиков; метаболизирует широкий спектр лекарственных препаратов. Наиболее важными определяющими факторами различия эффективности применения лекарственного препарата или метаболизма ксенобиотика являются три варианта генотипа с потерей функции в гене CYP2C19 (*2,*3 и *17), которые кодирует фермент цитохром P450.

Ген CYP2C9 

Кодирует цитохром Р450 2С9, монооксигеназу печени, который является ферментом первой фазы детоксикации ксенобиотиков и отвечает за метаболизм многих групп лекарственных препаратов и других ксенобиотиков, а также участвует в синтезе холестерина и других липидов.

Ген CYP2D6 

Кодирует белок – член семейства цитохрома Р450, метаболизирует около 25% часто используемых лекарств, таких, как бета-адреноблокаторы, антиаритмические препараты, антидепрессанты, нейролептики и анальгетики.

Взятие образцов венозной крови для исследования ДНК может производиться в любое время суток, прием пищи или специальная диета не повлияют на результат. 

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

• переливание крови или трансплантация костного мозга, которые проводились в недавнем времени (в данном случае исследование ДНК не рекомендуется проводить в течение, как минимум, 1 месяца после трансплантации или переливания крови);
• контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется в любое время суток. 

• Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов.
• Непосредственно перед взятием образцов тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта. Подождать пару минут, чтобы во рту накопилась слюна.
• У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления.
• Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.
• Перед взятием образца наденьте стерильные перчатки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой.

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы буккального эпителия должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах.

Для выполнения данного исследования используются образцы биологического материала двух типов: венозная кровь или буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Венозная кровь

Тип пробирки: Вакуумная пробирка с ЭДТА

Минимальный объем биологического материала: 2 мл (допускается прием пробирок объемом 4-6 мл)

Процедура взятия биологического материала:

Взятие крови осуществляют из вены в положении пациента сидя или лежа. Кровь должна поступать свободным током непосредственно в вакуумную пробирку с ЭДТА (фиолетовая крышка). После взятия крови пробирку следует плавно перевернуть 5-10 раз для перемешивания с антикоагулянтом.

Центрифугирование: не требуется

Условия хранения: хранение биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ (допускается накапливание биоматериала в заданном температурном режиме до 7 календарных дней). При более длительном хранении кровь необходимо заморозить при температуре -18…-23℃

Условия транспортировки:

Транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (синяя коробка). Замороженный биоматериал – при температуре -18…-23℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (красная коробка).

Не рекомендуется проводить повторное замораживание – оттаивание образцов

Буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется с внутренней стороны щеки с использованием одноразовых зондов.

Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов

Состав набора для взятия буккального эпителия:

• зонд с щеточкой, 2 шт.;
• стерильная емкость для зонда с щеточкой, 2 шт.;
• стерильные одноразовые перчатки, 1 пара;
• индивидуальный zip пакет, 1 шт.

Процедура взятия биологического материала:

Непосредственно перед взятием образцов необходимо тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта.

Подождите пару минут, чтобы во рту накопилась слюна. Наденьте стерильные перчатки. Аккуратно извлеките зонд из упаковки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой. Сделайте щеточкой 10-20 круговых движений по внутренней поверхности обеих щек. Извлеките зонд из ротовой полости, поместите его в стерильную сухую емкость, закройте крышку. Повторите эту процедуру вторым зондом. После взятия второго образца поместите второй зонд во вторую емкость. Обе емкости с зондами поместите в индивидуальный zip-пакет.

У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления. Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах

Условия хранения : при температуре +18+25℃

Условия транспортировки: 

транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +18+25℃