Определение оптимальной дозировки непрямых антикоагулянтов (Варфарин, Аценокумарол, Фенпрокумон) - раздела Определение чувствительности к лекарственным препаратам для лечения

Полиморфизмы

Интерпретация результатов по теме теста

Данные, полученные в результате исследования мутаций в генах, задействованных в метаболизме витамин-К-зависимых факторов, помогут определить оптимальную дозировку препаратов-антикоагулянтов.

Ген CYP2C9 

Кодирует цитохром Р450 2С9 - монооксигеназу печени, который является ферментом первой фазы детоксикации ксенобиотиков, отвечает за метаболизм многих групп лекарственных препаратов, таких как: фенитоин, ибупрофен, толбутамид и варфарин, а также участвует в синтезе холестерина и других липидов.

У пациентов, являющихся носителями «медленных» аллелей (*2, *3, *5 или *6), риск возникновения кровотечений возрастает в 2-3 раза, а чрезмерной гипокоагуляции (МНО более 4) – в 3-4 раза. У пациентов с «медленными» аллелями терапевтическая доза непрямых коагулянтов должна быть уменьшена.

Ген VKORC1 

Кодирует фермент, который активирует витамин К и участвует в свертывании крови. Дефицит фермента может приводить к тотальному снижению активности всех витамин-K-зависимых факторов. Активность VKORC1 ингибируется широко известным антикоагулянтом варфарином.

Наличие мутантных аллелей в гене VKORC1 существенно снижает активность фермента, поэтому стандартные дозы варфарина могут оказаться избыточными и привести к геморрагическим осложнениям. Для пациентов с такими мутациями требуется подбор индивидуальных, более низких доз препаратов, с учетом их генотипа.

Ген CYP4F2 

Кодирует белок - член суперсемейства цитохрома Р450 - монооксигеназы, катализирующей множество реакций и участвующей в метаболизме лекарств, холестерина, стероидов и других липидов. Монооксигеназа участвует в метаболизме линолевой кислоты, опосредуя превращение лейкотриенов-B (LTB4) в омега-гидроксилированный метаболит 20-гидроксилейкотриен-B (20-ОН LTB4). Мутации гена CYP4F2, оказывают влияние на обмен cyp4f2-метаболизируемых лекарственных средств, а также на токсичность и выбор дозы антагонистов витамина К.

Аллель *3 и Генотип *3/*3 

Связан с необходимостью терапии повышенными дозами варфарина при условии стабильности показателя МНО по сравнению с дозами для носителей генотипа *1/*1; а также связан со снижением риска возникновения кровотечений при терапии варфарином.

Взятие образцов венозной крови для исследования ДНК может производиться в любое время суток, прием пищи или специальная диета не повлияют на результат. 

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

• переливание крови или трансплантация костного мозга, которые проводились в недавнем времени (в данном случае исследование ДНК не рекомендуется проводить в течение, как минимум, 1 месяца после трансплантации или переливания крови);
• контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется в любое время суток. 

• Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов.
• Непосредственно перед взятием образцов тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта. Подождать пару минут, чтобы во рту накопилась слюна.
• У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления.
• Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.
• Перед взятием образца наденьте стерильные перчатки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой.

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы буккального эпителия должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах.

Для выполнения данного исследования используются образцы биологического материала двух типов: венозная кровь или буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Венозная кровь

Тип пробирки: Вакуумная пробирка с ЭДТА

Минимальный объем биологического материала: 2 мл (допускается прием пробирок объемом 4-6 мл)

Процедура взятия биологического материала:

Взятие крови осуществляют из вены в положении пациента сидя или лежа. Кровь должна поступать свободным током непосредственно в вакуумную пробирку с ЭДТА (фиолетовая крышка). После взятия крови пробирку следует плавно перевернуть 5-10 раз для перемешивания с антикоагулянтом.

Центрифугирование: не требуется

Условия хранения: хранение биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ (допускается накапливание биоматериала в заданном температурном режиме до 7 календарных дней). При более длительном хранении кровь необходимо заморозить при температуре -18…-23℃

Условия транспортировки:

Транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (синяя коробка). Замороженный биоматериал – при температуре -18…-23℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (красная коробка).

Не рекомендуется проводить повторное замораживание – оттаивание образцов

Буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется с внутренней стороны щеки с использованием одноразовых зондов.

Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов

Состав набора для взятия буккального эпителия:

• зонд с щеточкой, 2 шт.;
• стерильная емкость для зонда с щеточкой, 2 шт.;
• стерильные одноразовые перчатки, 1 пара;
• индивидуальный zip пакет, 1 шт.

Процедура взятия биологического материала:

Непосредственно перед взятием образцов необходимо тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта.

Подождите пару минут, чтобы во рту накопилась слюна. Наденьте стерильные перчатки. Аккуратно извлеките зонд из упаковки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой. Сделайте щеточкой 10-20 круговых движений по внутренней поверхности обеих щек. Извлеките зонд из ротовой полости, поместите его в стерильную сухую емкость, закройте крышку. Повторите эту процедуру вторым зондом. После взятия второго образца поместите второй зонд во вторую емкость. Обе емкости с зондами поместите в индивидуальный zip-пакет.

У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления. Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах

Условия хранения : при температуре +18+25℃

Условия транспортировки: 

транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +18+25℃