Болезнь Крона - раздела Генетические факторы риска нарушений обмена

Полиморфизмы

Интерпретация результатов по теме теста

Болезнь Крона встречается в популяции довольно редко, что относит это аутоиммунное заболевание к орфанным патологиям. В воспалительный процесс вовлекаются внутренняя слизистая оболочка, подслизистая, возможно поражение мышечного слоя. Исследование направлено на выявление генетической предрасположенности к болезни Крона вследствие врожденных нарушений реакции иммунной системы на чужеродные бактерии и степени выраженности воспалительной реакции.

Ген NOD2 

Является членом семейства Nod1/Apaf-1 и кодирует 2 домена активации каспазы (CARD15) и 6 лейцин-обогащенных повторов (LRRs). Эти домены связывают бактериальные липополисахариды, активируют NF-kB сигнальный путь, секрецию провоспалительных цитокинов и апоптоз клеток. Продукт мутантного гена NOD2 существенно повышает риск болезни Крона, изменяя распознавание компонентов патогенных микроорганизмов и / или чрезмерно активируя NF-kB в моноцитах. Носители одного аллеля Trp имеют 3-х кратный риск, двух аллелей – 35-ти кратный риск заболевания болезнью Крона, а также дибетом 1-го типа.

Ген NKX2-3 

Кодирует гомеодомен-содержащий транскрипционный фактор из семейства NKX транскрипционных факторов. Принимает участие в дифференцировке клеток. Мутации в этом гене связаны с болезнью Крона. Носительство двух аллелей G повышает риск развития болезни Крона в 1,62 раза, носительство одного аллеля – в 1,2 раза по сравнению со среднепопуляционным.

Ген PTPN2 

Кодирует белок-фермент (нерецепторная тирозинспецифическая фосфатаза), являющийся членом семейства белка тирозинфосфатазы (PTP) – сигнальной молекулы, которая регулирует различные клеточные процессы, включая клеточный рост, дифференцировку, митотический цикл и онкогенную трансформацию. С мутациями в гене PTPN2 может быть связан ряд аутоиммунных заболеваний, включающий в себя диабет 1-го типа, ревматоидный артрит, болезнь Крона. Носители двух аллелей G имеют 2-х кратный, одного – 1,3-х кратный риск заболевания болезнью Крона по сравнению со среднепопуляционным.

Взятие образцов венозной крови для исследования ДНК может производиться в любое время суток, прием пищи или специальная диета не повлияют на результат. 

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

• переливание крови или трансплантация костного мозга, которые проводились в недавнем времени (в данном случае исследование ДНК не рекомендуется проводить в течение, как минимум, 1 месяца после трансплантации или переливания крови);
• контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется в любое время суток. 

• Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов.
• Непосредственно перед взятием образцов тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта. Подождать пару минут, чтобы во рту накопилась слюна.
• У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления.
• Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.
• Перед взятием образца наденьте стерильные перчатки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой.

Обращаем внимание, что на результаты исследования ДНК могут повлиять следующие факторы:

контаминация образца чужим генетическим материалом (например, при взятии и транспортировке), поэтому все манипуляции с образцами биологического материала рекомендуется проводить в стерильных перчатках.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы буккального эпителия должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах.

Для выполнения данного исследования используются образцы биологического материала двух типов: венозная кровь или буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Венозная кровь

Тип пробирки: Вакуумная пробирка с ЭДТА

Минимальный объем биологического материала: 2 мл (допускается прием пробирок объемом 4-6 мл)

Процедура взятия биологического материала:

Взятие крови осуществляют из вены в положении пациента сидя или лежа. Кровь должна поступать свободным током непосредственно в вакуумную пробирку с ЭДТА (фиолетовая крышка). После взятия крови пробирку следует плавно перевернуть 5-10 раз для перемешивания с антикоагулянтом.

Центрифугирование: не требуется

Условия хранения: хранение биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ (допускается накапливание биоматериала в заданном температурном режиме до 7 календарных дней). При более длительном хранении кровь необходимо заморозить при температуре -18…-23℃

Условия транспортировки:

Транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +2…+8℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (синяя коробка). Замороженный биоматериал – при температуре -18…-23℃ в специальном термоконтейнере с хладагентом (красная коробка).

Не рекомендуется проводить повторное замораживание – оттаивание образцов

Буккальный эпителий (соскоб с внутренней поверхности щеки)

Взятие образцов буккального эпителия осуществляется с внутренней стороны щеки с использованием одноразовых зондов.

Требуется воздержаться от еды, питья, а также курения за полчаса до сбора образцов

Состав набора для взятия буккального эпителия:

• зонд с щеточкой, 2 шт.;
• стерильная емкость для зонда с щеточкой, 2 шт.;
• стерильные одноразовые перчатки, 1 пара;
• индивидуальный zip пакет, 1 шт.

Процедура взятия биологического материала:

Непосредственно перед взятием образцов необходимо тщательно прополоскать рот чистой водой без использования гигиенических средств для полости рта.

Подождите пару минут, чтобы во рту накопилась слюна. Наденьте стерильные перчатки. Аккуратно извлеките зонд из упаковки. Постарайтесь не дотрагиваться до конца зонда с щеточкой. Сделайте щеточкой 10-20 круговых движений по внутренней поверхности обеих щек. Извлеките зонд из ротовой полости, поместите его в стерильную сухую емкость, закройте крышку. Повторите эту процедуру вторым зондом. После взятия второго образца поместите второй зонд во вторую емкость. Обе емкости с зондами поместите в индивидуальный zip-пакет.

У детей, находящихся на грудном вскармливании, образцы следует брать через 30 минут после кормления. Непосредственно перед взятием образца младенцу необходимо дать попить воды из бутылочки.

Для исключения взаимного переноса биологического материала образцы должны храниться в отдельных пробирках и отдельных пакетах

Условия хранения : при температуре +18+25℃

Условия транспортировки: 

транспортировку биологического материала следует осуществлять при температуре +18+25℃